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微生物肥料行業標准(NY 227-94)

(發布日期:2007-2-13 12:24:03)
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標准類別:NY-行業標准(農業)

  關鍵詞:微生物肥料

  標准號:NY227—94

  標准名稱:微生物肥料*

  標准分類:農業土壤化肥標准

  頒布部門:

  頒布日期:

  實施日期:

  ========================================================

  1主題內容與適用範圍

  本標准規定了微生物肥料産品的分類、技術要求、試驗方法、檢驗規則、包裝、標志、運

  輸與貯存。

  本標准適用于有益微生物制成的,能改善作物營養條件(又有刺激作用)的活體微生物肥料制品。

  2引用標准

  GB8172蛔蟲卵測定方法

  GB4789大腸菌值測定方法

  GB7468總汞測定方法

  GB7471總镉測定方法

  GB7466總鉻測定方法

  GB7485總砷測定方法

  GB7470總鉛測定方法

  3産品分類

  31根瘤菌肥料:能在豆科植物上形成根瘤(或莖瘤),同化空氣中的氮氣,供應豆科植物

  的氮素營養。用根瘤菌屬(Rhizobium)或慢生根瘤菌屬(Bradyrhizobium)的菌株制造。

  32固氮菌肥料:在土壤和很多作物根際中同化空氣中的氮氣,供應作物氮素營養;又能

  分泌激素刺激作物生長。用下列菌種之一制造。

  固氮菌屬(Azotobacter)

  氮單胞菌屬(Azomonas)

  固氮根瘤菌屬(Azorhizobium)

  根際聯合固氮菌:固氮螺菌屬(Azospirillum)

  陰溝腸杆菌(Enterobactercloacea)經鑒定爲非致病菌

  糞産堿菌(Alcaligenesfaecalis)經鑒定爲非致病菌

  肺炎克氏杆菌(Klebsiellapneumoniae)經鑒定爲非致病菌

  其他經過鑒定的用于固氮菌肥料生産的菌種。

  這些菌主要特征是在含一種有機碳源的無氮培養基中能固定分子態氮。

  33磷細菌肥料:能把土壤中難溶性磷,轉化爲作物可以利用的有效磷,改善作物磷素營

  養。用下列菌種之一制造。

  分解有機磷化合物的細菌:

  解磷巨大芽胞杆菌(Bacillusmegatheriumphosphaticum)

  解磷珊瑚紅賽氏杆菌(Serratiacarolleraphosphaticum)

  節杆菌屬中的一些種(Arthrobactersp.)

  轉化無機磷化合物的細菌:

  假單胞菌屬中的一些種(Pseudomonassp.)

  其他經過鑒定的用于磷細菌肥料生産的菌種。

  有機磷細菌在含磷礦粉或卵磷脂的合成培養基上有一定解磷作用,在麥麸發酵液中都含刺激植物生長的生長素物質。

  無機磷細菌具有溶解難溶性磷酸鹽的作用。

  34硅酸鹽細菌肥料:能對土壤中雲母,長石等含鉀的鋁硅酸鹽及磷灰石進行分解,釋放

  出鉀、磷與其他灰分元素,改善作物的營養條件。本品的生産菌種爲膠質芽胞杆菌(Bacil

  lusmucilginosus)的菌株及其他經過鑒定的用于硅酸鹽細菌肥料生産的菌種。

  該菌在含鉀長石粉的無氮培養基上有一定解鉀作用,菌體內和發酵液中存在刺激植物生長的生長素物質。

  35複合微生物肥料:含有上述(解磷、解鉀、固氮微生物)或其他經過鑒定的兩種以

  上互不拮抗微生物,通過其生命活動,能增加作物營養供應量。

  4技術要求

  41成品技術指標1)

  表1成品技術指標1)

  劑型液體固體顆粒

  項目

  黑褐色或褐色粉

  1.外觀無異臭味液體褐色顆粒

  狀、濕潤、松散

  2有效活菌數

  根瘤菌肥料

  慢生根瘤菌,億/mL#511

  快生根瘤菌,億/mL#1021

  固氮菌肥料,億/mL#511

  硅酸鹽細菌肥料,億/mL#1021

  磷細菌肥料

  有機磷細菌,億/mL#511

  無機磷細菌,億/mL#1532

  複合微生物肥料,億/mL#1021

  3水分,%-20!35<10

  4細度,mm-粒徑0.18粒徑2.5!4.5

  5有機質(以C計),%#2025

  (以蛭石等作爲吸附劑不在此列)

  6pH5.5!76.0!7.56.0!7.5

  7雜菌數,%$51520

  8有效期不得低于六個月

  注:1)在産品標明的失效期前有效活菌數應符合指標要求,出廠時産品有效活菌數必須高出本指檔30%以上。

  42成品無害化指標

  表2成品無害化指標

  編號參數單位標准限值

  1.蛔蟲卵死亡率%95!100

  2大腸杆菌值101

  3汞及化合物(以Hg計)mg/kg$5

  4镉及化合物(以Cd計)mg/kg$3

  5鉻及化合物(以Cr計)mg/kg$70

  6砷及化合物(以As計)mg/kg$30

  7鉛及化合物(以Pb計)mg/kg$60

  5檢測方法

  51外觀

  感觀檢驗符合41成品技術指標。

  52有效活菌數和雜菌含量測定

  521試劑和溶液

  a.無菌水、蒸餾水;

  b.選擇培養基(附錄A);

  c.剛果紅染液(0.5%)。

  522儀器

  a.顯微鏡1000;

  b.搖床旋轉式200r/min;

  c.恒溫培養箱;

  d.恒溫烘幹箱;

  e.滅菌鍋;

  f.扭力天平(分度值0.01g);

  g.玻璃儀器(滅菌的9cm平皿、10mL、5mL、1mL吸管、三角瓶、玻璃刮刀)。

  523測定步驟

  5231采樣應不少于500g,從中稱取10!20g

  (精確0.01g),加入帶玻璃珠的100!

  200mL的無菌水中(液體菌劑取10!20mL,加入90!180mL的無菌水中),靜置20min後在

  旋轉式搖床上200r/min充分振蕩30min,即成母液的菌懸液。

  5232用無菌吸管吸取5mL上述母液的菌懸液加入45mL無菌水中,混勻成110稀釋的菌懸液,這樣依次稀釋,分別得到11l02,11103和11104,11105等濃度(每個稀釋度必須更換無菌吸管)。

  5233用1mL無菌吸管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1mL,加至直徑爲9cm平皿的瓊脂培養基表面,用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻地塗于瓊脂表面。或取1mL不同稀釋度菌懸液加入培養皿內,與瓊脂培養基混勻。每個樣品取3個連續適宜稀釋度,每一稀釋度重複3次,同時加無菌水的空白對照,培養2!5d,每個稀釋度取5!10個菌落的菌體,塗片染色,顯微鏡觀察識別後計數菌落。

  524計算公式:

  統計算出同一稀釋度三個平皿上菌落平均數。

  根據式(1)和式(2)計算:

  菌劑含菌數=菌落平均數稀釋倍數母液菌懸液的體積

  菌劑數…………(1)

  雜菌率(%)=雜菌數

  有效菌數+雜菌數100……………………(2)

  根據菌落特征判定,分別計算出制品中的特定微生物及雜菌數率。固體(包括顆粒)菌劑含菌數以億/g表示,液體菌劑含菌數以億/mL表示。

  525菌落計數

  5251以平板上出現30!300個菌落數的稀釋度平板爲計數標准。

  5252當只有一個稀釋度,其平均菌落數在30!300之間時,則以該平均菌落數乘以其稀釋倍數(見表3例1)。

  5253若有兩個稀釋度,其平均菌落數均在30!300之間,應按兩者菌落總數之比值來決定。若其比例小于2應計數兩者的平均數,若大于2則計數其中稀釋較小的菌落總數(見表3例2及例3)。

  5254若三個稀釋度的平均菌落數均大于300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數(見表3例4)。

  5255若三個稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數(見表3例5)。

  5256若三個稀釋度的平均菌落數均不在30!300之間,則以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數(見表3例6)。

  表3計算菌落總數方法的示例

  不同稀釋度的平均菌落數兩個稀釋度菌落總數

  例次10-510-610-7菌落數之比個/mL或個/g

  1143115922-1.6108

  22760235311.32.7108

  32676136342.51.4108

  4無法計數1142312-3.1109

  528125-2.8106

  6無法計數30318-3.0108

  53含水量測定

  531儀器

  a.土壤鋁盒;

  b.扭力天平(分度值0.01g);

  c.恒溫烘幹箱;

  d.幹燥器。

  532測定步驟

  稱取樣品30!40g

  (精確到0.01g)二份放入鋁盒中,于105條件下烘烤4h直至恒重,

  取出後放入幹燥器內冷卻,一般冷卻20min,再稱其殘重和鋁盒重,損失量即爲水分含量。

  533計算公式:

  m

  H0-m1

  2O%=m100……………………………………………………………(3)

  0

  式中:m0———表示烘幹前樣品重,g;

  m1———表示烘幹後樣品重,g。

  54pH值測定

  541試劑和溶液

  無離子水。

  542儀器

  a.燒杯;

  b.酸度計;

  c.扭力天平(分度值0.01g)。

  543測定步驟

  隨機稱取樣品8g,將樣品置于幹淨燒杯內,按12加入無離子水,浸泡振蕩均勻。預熱pH計,用標准溶液(pH6.86)校正儀器後,測定樣品懸液pH,邊測邊攪拌,儀器讀數穩定後記錄。每個樣品重複三次。

  55細度檢驗

  551儀器

  a.扭力天平(分度值0.01g);

  b.標准篩孔徑0.18mm孔徑0.25mm。

  552測定步驟

  供檢樣100g,經過105烘幹1h,過孔徑018mm標准篩,篩下部分占檢樣重量#80%,其他部分全部通過孔徑025mm篩,即爲合格。

  56有機質測定

  561儀器

  a.瓷坩埚;

  b.烘箱;

  c.高溫電爐;

  d.幹燥器;

  e.扭力天平(分度值0.01g)。

  562測定步驟

  采用灼燒減重法測定。稱取樣品10g,置已稱重的瓷坩埚中于60烘箱中烘4!6h,冷卻稱重(m0)。然後在550!600高溫電爐中灼燒2h,用坩埚鉗取至幹燥器中,放冷至室溫,稱重(m1)。

  563計算公式

  有機質m

  %=0-m1

  m100…………………………(4)

  式中:m0———表示坩埚加烘幹樣品重,g;

  m1———表示坩埚加灼燒後樣品重,g;

  m———表示風幹後樣品重,g。

  57有毒物質(重金屬)的測定

  571汞

  按GB7468操作。

  572镉

  按GB7471操作。

  573鉻

  按GB7466操作。

  574砷

  按GB7485操作。

  575鉛

  按GB7470操作。

  58蛔蟲卵的測定

  按GB8172操作。

  59大腸菌值的測定

  按GB4789操作。

  6檢驗規則

  61生産微生物肥料所使用的菌種,須在本標准菌種規定範圍之內。若使用規定之外的菌種,必須經過國家級科研單位的鑒定,包括菌種屬及種的學名,形態,生理生化特性,效力,安全性等完整資料。以杜絕一切植物檢疫對象,傳染病病源作爲菌種生産的産品。

  62本標准規定中的成品無害化指標和有效活菌數、雜菌數及有效期,是微生物肥料質量安全、有效的重要依據,一切微生物肥料的産品必須達到的指標。成品無害化檢驗可委托省市以上環境監測機構進行,並提供檢驗證明。有效活菌數、雜菌數,由農業部指定檢測機構檢驗。本標准所規定的外觀、水分、細度、有機質和pH值等指標,作爲微生物肥料質量檢驗參考指標。

  63複合微生物肥料,是指兩種以上微生物菌種的複合。不論使用何種微生物菌種、幾種菌種生産,其菌種必須符合本標准(6.1)規定。而且有效活菌數:液體型不得低于10億/mL固體型不得低于2億/g,顆粒型不得低于1億/g。複合微生物肥料的成分中,除主體微生物外,含有其他基質成分的,其基質成分應有利于微生物肥料中的菌體生存,絕不能降低或抑制菌體的存活。因加基質成分過多、不當,微生物肥料有效活菌數過低或有效活菌數測不出來的而不達標者,則該産品不是微生物肥料。

  64微生物肥料應由生産廠的技術檢驗部門進行檢驗,生産廠應保證所有出廠的微生物肥料都達到本標准要求,每批出廠的微生物肥料都應附有一定格式的質量合格證明。

  65微生物肥料按批檢驗,以每一發酵罐生産的産品爲一批。

  66取樣方法,隨機抽樣,以箱或袋爲抽樣單位。每批固體菌劑抽樣5!10箱。每箱中抽1袋,無菌操作取樣100g,混勻用四分法縮分到500g,供檢驗用。顆粒菌劑每批抽樣5

  或10袋,無菌操作,每袋取樣05kg,仔細混勻後,用四分法縮分到500g,以供檢驗用。

  液體菌劑每批抽樣5或10箱,每箱抽1瓶,無菌操作,每瓶吸取5mL一同放入無菌的三角瓶中,搖均勻,瓶上粘貼標簽,標明産品名稱、取樣日期、批號、取樣人,以供檢驗用。

  67如果檢驗結果不符合標准規定時,應以加倍數量按規定選取試樣進行檢驗,如仍不

  符合標准規定,該批産品判爲不合格。

  7包裝、標志、運輸與貯存

  71微生物肥料固體菌劑內包裝材料用聚乙烯薄膜袋,外用紙箱包裝。液體菌劑小包裝用玻璃質疫苗瓶或塑料瓶,外包裝紙箱。顆粒菌劑用編織袋內襯塑料薄膜袋包裝,袋口須密封牢固。

  72包裝箱(袋)上應印有産品名稱、商標、標准號、生産許可證號、生産廠名、廠址、生産日期、有效期、批號、淨重、防曬、防潮、易碎、防倒置等標記。內包裝袋上應印有産品名稱、商標、標准號、有效細菌含量,研制、生産單位,産品性能及使用說明。

  73每箱(袋)産品中附有産品合格證和使用說明書。

  74適用于常用運輸工具,運輸過程中應有遮蓋物,防雨淋、防日曬及35以上高溫。氣溫低于0時需用保溫車(8!10)運輸。輕裝輕卸,避免破損。

  75微生物肥料應貯存在常溫、陰涼、幹燥、通風的庫房內,不得露天堆放,以防雨淋和日曬,防止長時間35以上高溫。碼放高度$130cm。

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